35
Seguimiento de la respuesta terapéutica al benznidazol en pacientes con enfermedad de Chagas crónica mediante proteínas recombinantes
Autores:
María José Muñoz Dávila. Hospital Universitario "Virgen de la Arrixaca". Murcia. España
Laura Murcia Flores*. Hospital Universitario "Virgen de la Arrixaca". Murcia. España
Bartolomé Carrilero Fernández. Hospital Universitario "Virgen de la Arrixaca". Murcia. España
Ana I. Fernández-Villegas. Instituto de Parasitología y Biomedicina López Neyra. Granda. España
M. Carmen Thomas. Instituto de Parasitología y Biomedicina López Neyra. Granda. España
Manuel Segovia Hernández. Hospital Universitario "Virgen de la Arrixaca". Murcia. España
Objetivo: Las técnicas serológicas convencionales que utilizan extracto proteico total o mezcla de proteínas recombinantes de Trypanosoma cruzi como antígenos presentan elevada sensibilidad para el diagnóstico de la enfermedad de Chagas (EC). Sin embargo, estas técnicas no resultan útiles para la monitorización a corto y medio plazo de la respuesta terapéutica en pacientes tratados ya que los títulos de anticuerpos se mantienen elevados durante un largo periodo de tiempo. El objetivo del presente estudio fue analizar la respuesta humoral de los sueros de pacientes adultos chagásicos crónicos en diferente estadio clínico frente a los péptidos recombinantes KMP11, HSP70 y PFR2 (Fernández-Villegas et al., 2011) a diferentes tiempos post-tratamiento con benznidazol en área no endémica.
Material y Métodos: Un total de 40 pacientes adultos diagnosticados de EC crónica se incluyeron en este estudio. De estos, un 55% (22) presentaban sintomatología: cardiaca 32,5% (13), digestiva 7,5% (3) y ambas 15% (6). Las proteínas recombinantes de T. cruzi: KMP11 (Kinetoplastid membrane protein-11), HSP70 (Heat shock protein-70) y PFR2 (Paraflagellar rod protein-2) fueron sobre-expresadas y purificadas como previamente se ha descrito (Thomas et al. 2000, Marañon et al. 2000, Morell et al. 2006). De cada paciente se estudio la reactividad sérica antes del inicio del tratamiento con benznidazol y a los 150, 420 días y segundo año post-tratamiento en área no endémica. La técnica ELISA se realizó según protocolo descrito por Fernández-Villegas et al., 2011. Para el análisis estadístico se utilizó el test Mann Withney U, el test de Wilcoxon y el análisis de correlación de Pearson.
Resultados: Las tres proteínas recombinates fueron reconocidas de forma estadísticamente significativa por los sueros de pacientes con EC crónica. En la mayoría de los pacientes chagásicos se apreció un descenso estadísticamente significativo en la reactividad frente a KMP11, HSP70 y PFR2 tras el tratamiento. Esta disminución tuvo lugar a diferentes tiempos en función del antígeno estudiado (420 días KMP11 y 150 días HSP70 y PFR2) y se mantuvo a lo largo de todo el periodo de estudio. Atendiendo a la forma clínica de la enfermedad, en los pacientes asintomáticos se observo un descenso estadísticamente significativo en la reactividad frente HSP70 y PFR2 a los 150 días. En pacientes con sintomatología cardíaca, la reactividad disminuyó de forma estadísticamente significativa frente a todos los antígenos estudiados a diferentes tiempos (KMP11 segundo año, HSP70 y PFR2 420 días). No se observó un descenso estadísticamente significativo en la reactividad frente a ninguno de los antígenos estudiados en pacientes con sintomatología digestiva. En los pacientes con manifestaciones mixtas (cardíacas y digestivas), solo se apreció un descenso estadísticamente significativo en la reactividad frente a KMP11 a los 420 días manteniéndose a lo largo del periodo de estudio.
Conclusiones: El estudio de la respuesta inmune humoral podría ser una herramienta útil para evaluar la influencia del tratamiento con benznidazol en pacientes con EC crónica. La forma clínica de la enfermedad determina un descenso diferencial en la reactividad frente a los antígenos estudiados.
Financiación: Redes Temáticas de Investigación Cooperativa de Centros de Enfermedades Tropicales (RICET) ref: RD06/0021/1007. Fondo de Investigación Sanitaria FIS ref: PS09/01956.
Palabras clave: Enfermedad de Chagas; Respuesta al tratamiento; Antígenos recombinantes;
