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DETECCION DE MUTACIONES DE RESISTENCIA EN AISLADOS CLÍNICOS DE MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS
Autores:
Pilar Ruiz*. Centro de Referencia de Micobacterias. Facultad de Medicina. H.U. Reina Sofía. Cordoba. España
Manuel Causse. Servicio de Microbiología. H.U.Reina Sofia. Cordoba. España
Juan Bautista Gutierrez Aroca. Servicio de Microbiología. H.U.Reina Sofia. Cordoba. España
Manuel Casal. Servicio de Microbiología. H.U.Reina Sofia. Cordoba. España
Introducción:
Las técnicas genéticas para la detección de las mutaciones de resistencia más frecuentes en Mycobacterium tuberculosis, han tenido un gran desarrollo en los últimos años. Genotype ® (Hain – Lifescience) ofrece dos test para la detección de estas mutaciones. Genotype ® MTBDRplus( detección de mutaciones a Rifampicina en el gen rpoB ) y detección de mutaciones a isoniazida (en el Kat G y en el inhA ) y Genotype ® MTBDRsl ( Detección de mutaciones a Etambutol en el embB, Amikacina y/ kanamicina y/o capreomicna en el rrs y a Fluorquinolonas en el gyrA). Con estos dos sistemas , podemos determinar de forma sencilla y rápida las cepas XDR (Extremadamente resistentes9.
El Objetivo de este trabajo es ver cuales son las principales mutaciones de resistencia en estas cepas en nuestro medio y a así de una forma rápida establecer los tratamientos adecuados.
Material y Método:
Estudiamos 83 cepas de Mycobacterium tuberculosis. De ellas 33 eran MDR y 6 XDR
fenotípicamente. Además como control, estudiamos 10 cepas fenotípicamente sensibles. El test de sensibilidad fenotípico , se realizó mediante el sistema MGIT 960TB para los antimicrobianos estreptomicina, rifampicina, etambutol, isoniazida , pirazinamoda, amikacina, kanamicina, capreomicina, ethionamida , linezolid, ofloxacino, ciprofloxacino, levofloxacino y moxifloxacino; y el estudio genotípico MTBDR plus y MTBDRsl según los protocolos estandarizados. Las discrepancias se intentaron resolver por secuenciación.
Resultados:
Los resultados fenotípicos fueron coincidentes con los genotípicos en todos los casos excepto para 3 cepas que fueron resistentes fenotípicamente a isoniazida y con este test no se detectó mutación y otras 3 cepas fenotípicamente sensibles a etambutol en los que se detectó mutación. Las mutaciones de resistencia detectadas, fueron las siguientes:
En el rpoB las mutaciones más frecuentes fue la mutación 3 con ausencia del wild type 8 seguida de la mutación 2A en el wild type 7; En el inhA la mutación 1 en el wild type 1 ; en el embB la mutación 1B; la mutación 1 en el wild type 1 delrrs y la mutación 2 en el gyrA.
Conclusiones: Consideramos estas técnicas como sistemas rápidos y fiables para la detección de las mutaciones más frecuentes en Mycobacterium tuberculosis.
Palabras clave: M. tuberculosis; Genotype MTBDR plus; Genotype MTBDRsl;
