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Eficacia "in vitro" de nitrato de plata (AgN03) y sulfadiazina argéntica (AgSD) sobre biofilms de Staphylococcus epidermidis.
Autores:
María Coronada Fernández Calderón *. Área de Microbiología. Dpto. de Ciencias Biomédicas. Facultad de Medicina. Uex. y CIBER-BBN.. Badajoz. España
María Delgado Rastrollo. Área de Microbiología. Dpto. de Ciencias Biomédicas. Facultad de Medicina. Uex. y CIBER-BBN.. Badajoz. España
María Teresa Blanco Roca. Área de Microbiología. Dpto. de Ciencias Biomédicas. Facultad de Medicina. Uex. y CIBER-BBN.. Badajoz. España
Cipriano Hurtado Manzano. Área de Microbiología. Dpto. de Ciencias Biomédicas. Facultad de Medicina. Uex. . Badajoz. España
Ciro Pérez Giraldo. Área de Microbiología. Dpto. de Ciencias Biomédicas. Facultad de Medicina. Uex. y CIBER-BBN.. Badajoz. España
Antonio Cándido Gómez García. Área de Microbiología. Dpto. de Ciencias Biomédicas. Facultad de Medicina. Uex. y CIBER-BBN.. Badajoz. España
INTRODUCCIÓN: Staphylococus epidermidis es responsable de infecciones relacionadas con la formación de biofilms sobre dispositivos intravasculares y otros biomateriales. El factor con mayor importancia en la formación de estos biofilms es el PIA (Polysaccharide Intercellular Adhesin), sintetizado por esta bacteria. En este sentido, es necesario conocer los posibles fármacos que puedan ser más útiles en la prevención y el tratamiento de estas infecciones. Por ello, el objetivo del trabajo fue el de valorar la eficacia de antisépticos como el nitrato de plata (AgN03) y la sulfadiazina argéntica (AgSD) en la disminución de la adherencia bacteriana y en la prevención de la formación de biofilms, así como en la erradicación de S. epidermidis una vez formado el biofilm.
MATERIAL Y MÉTODOS: Se eligieron 14 cepas de S. epidermidis productoras de biofilm. Se determinó la concentración mínima inhibitoria (CMI) y el efecto de sus concentraciones subinhibitorias (sub-CMIs) sobre el crecimiento y producción de biofilms. Se utilizó un método de microtitulación y se calculó el Índice Slime (IS), que relaciona la densidad del crecimiento con la del biofilm formado. También se analizó su influencia en la composición del biofilm por ensayo de disgregación, incluyendo la producción de PIA/PNAG por Dot-blot. Además, se estudió la acción de ambos antisépticos a concentraciones 10 y 100xCMI sobre bacterias incluidas en el biofilm maduro. Se calculó el número de bacterias viables en su interior, mediante un método bioluminiscente, cuantificando la cantidad de ATP.
RESULTADOS: La CMI90 fue de 32µg/ml para el AgNO3 y de 128µg/ml para la AgSD. El efecto de las sub-CMIs sobre la formación de biofilm dependió de la concentración. La de 1/2xCMI fue la única eficaz a la hora de disminuir el biofilm, debido a su efectividad para reducir el crecimiento. Sin embargo, con el resto de sub-CMIs se constató un aumento de la formación de biofilm, a pesar de que el crecimiento permanecía igual o disminuía. Este incremento se debía a un aumento de la producción de PIA/PNAG, además de otros componentes. En cuanto a la reducción de la viabilidad bacteriana, ambas concentraciones provocaron una reducción próxima al 100% de la viabilidad bacteriana del biofilm, a partir de las 3h de contacto.
CONCLUSIONES: Todas las cepas de S. epidermidis se inhiben por concentraciones de los antisépticos inferiores a las que son usadas habitualmente en clínica. Las sub-CMIs del AgNO3 y la AgSD, excepto la de 1/2xCMI, no evitarían las infecciones por S. epidermidis asociadas a biomateriales, debido a que incrementan la formación de biofilm, como consecuencia de un aumento en la producción de PIA/PNAG. La eficacia de ambos antisépticos para disminuir la viabilidad bacteriana en el interior de biofilms con un tiempo de contacto mínimo, les hace ser candidatos para su empleo en el tratamiento de estas infecciones.
Financiación: MAT2009-14695-C04-03 (Ministerio de Ciencia e Innovación); PRI09A031 y ayuda a Grupos de Investigación GR10031 (Consejería de Economía, Comercio e Innovación. Junta de Extremadura); FEDER y CIBER-BBN.
Palabras clave: Biofilm; Nitrato de plata; Sulfadiazina argéntica;
