Study of the susceptibility of yeast isolates of clinical interest to five antifungal agents using the E test

M.J. Linares, J.F. Muñoz, F. Solís, F.C. Rodríguez, A. Valero and M. Casal Department of Microbiology, Faculty of Medicine, University of Córdoba, Córdoba.

SUMMARY
The E test is a quantitative technique for determining antimicrobial susceptibility; it is based on the diffusion of a stable predetermined gradient of a specific antifungal agent along an inert plastic strip which is applied to a solid culture medium. The E test is an alternative method for determining inhibitory concentrations of antimicrobial agents. The aim of the present study was to determine the in vitro susceptibility of different yeasts to 5 antifungal agents using the E test. The antifungal susceptibility of 87 strains, 73 of which were yeasts obtained from clinical samples, 11 were Prototheca strains and 3 controls, were examined using a gradient diffusion technique (E test). Of these isolates, 13% of Candida albicans were resistant to flucytosine, and 20%, 17% and 33% showed resistance to ketoconazole, itraconazole and fluconazole, respectively. All Candida krusei isolates showed resistance to flucytosine and fluconazole. The Candida parapsilosis and Candida tropicalis strains all presented in vitro susceptibility to all the agents tested. Prototheca strains were only susceptible in vitro to amphotericin B. It was found that the E test was easy to perform, and provided MIC values similar to those obtained with other well documented techniques. It was therefore concluded that the E test could be implemented as a standard procedure in clinical mycology laboratories.
Key words: In vitro susceptibility - Antifungal agents - Candida - Prototheca - E test

Estudio de sensibilidad de aislamientos levaduriformes de interés clínico a cinco antifúngicos mediante E test

RESUMEN
El E test es una técnica cuantitativa para determinar la sensibilidad antimicrobiana. El sistema está basado en la difusión de un gradiente exponencial predefinido de un antifúngico determinado, utilizando un soporte de plástico inerte que se aplica a un medio de cultivo sólido y constituye una alternativa a otros métodos en la determinación de las concentraciones inhibitorias de los antimicrobianos. El objetivo de este estudio fue determinar la sensibilidad in vitro de distintos organismos levaduriformes frente a cinco antifúngicos mediante el sisterna E test. Se ha realizado un estudio de la sensibilidad frente a diferentes antifúngicos de 87 cepas, de las cuales 73 correspondían a organismos levaduriformes procedentes de muestras clínicas, 11 al género Prototheca y 3 eran cepas de referencia, empleando una técnica de difusión de gradientes (E test). El 13% de los aislamientos de Candida albicans se manisfestaron como resistentes a flucitosina; el 20%, el 17% y el 33% de dichos aislamientos se comportaron como resistentes a ketoconazol, itraconazol y fluconazol, respectivamente. Todos los aislamientos de C. krusei se manifestaron resistentes a flucitosina y fluconazol. Todos los aislamientos de C. parapsilosis y C. tropicalis se mostraron sensibles in vitro a todos los antifúngicos probados. Las cepas del genero Prototheca sólo se mostraron sensibles in vitro a amfotericina B. El E test es un método facil de realizar y proporciona resultados de CMI similares a los obtenidos con otras técnicas ampliamente estudiadas, por lo que consideramos que podría ser incorporado a la rutina de los laboratorios de micología clínica.
Palabras clave: Sensibilidad in vitro - Agentes antifúngicos - Candida - Prototheca - E test


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