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DIVERSIDAD GENÉTICA DE AISLADOS DE E.coli PORTADORES DE CMY-2 OBTENIDOS DE PACIENTES HOSPITALIZADOS.
Autores:
Mª José Gude González*. Servicio de Microbiología. Hospital Clínico Universitario Lozano Blesa. Zaragoza. España
Cristina Seral García. Servicio de Microbiología. Hospital Clínico Universitario Lozano Blesa. Universidad de Zaragoza. Zaragoza. España
Yolanda Sáenz Domínguez. Área de Microbiología Molecular. Centro de Investigación Biomédica de La Rioja (CIBIR). Logroño. España
Beatriz Rojo Bezares. Área de Microbiología Molecular. Centro de Investigación Biomédica de La Rioja (CIBIR). Logroño. España
Carmen Torres Manrique. Área Microbiología Molecular.Centro de Investigación Biomédica de La Rioja.Universidad de La Rioja. Logroño. España
F. Javier Castillo García. Servicio de Microbiología. Hospital Clínico Universitario Lozano Blesa. Universidad de Zaragoza. Zaragoza. España
Objetivo: Analizar la diversidad genética de aislados de E. coli portadores de la variante plasmídica blaCMY-2, de pacientes ingresados en el H.C.U. Lozano Blesa de Zaragoza durante el periodo de Junio 2008-Diciembre 2010.
Material y métodos: Se incluyeron en el estudio todos los aislados de E. coli portadores de blaCMY-2, detectada mediante PCR multiplex y posterior secuenciación, obtenidos de pacientes ingresados en nuestro hospital. Se incluyeron en el estudio el primer aislado de cada paciente y aislados sucesivos en un periodo de tiempo superior a un mes y los aislados que presentaron cambios en la sensibilidad antibiótica. El estudio de la relación clonal se realizó mediante electroforesis en gel de campo pulsado (PFGE) utilizando la enzima XbaI. Los diferentes perfiles obtenidos se analizaron con el programa informático BioNumerics versión 6.5.0 (Applied Maths®). Las cepas fueron definidas como relacionadas con un perfil de XbaI-PFGE ≥85% de similitud. Los resultados fueron interpretados según los criterios de Tenover. Se estudió además la sensibilidad de estos aislados a otros antibióticos mediante un sistema de microdilución en caldo (WIDER®, Francisco Soria Melguizo, Madrid, España).
Resultados: Durante el periodo de tiempo estudiado, se detectaron 28 aislados de E. coli portadores de blaCMY-2, obtenidos de 21 pacientes (13 varones, 8 mujeres) distribuidos de la siguiente manera: servicios quirúrgicos (64,28%), médicos (14,28%), UCI (10,71%) y otros (10,71%). Los aislados se obtuvieron de muestras de orina (50%), piel, partes blandas y herida quirúrgica (35,71%), líquidos orgánicos (10,71%) y catéter (3,57%).
Los 28 aislados se agruparon en 22 pulsotipos diferentes. Ocho de los aislados presentaron patrones de bandas indistinguibles dos a dos. Dos pares de aislados demostraron estar estrechamente relacionados, con dos únicas bandas de diferencia entre ambos pulsotipos. De estas cepas, 6 se obtuvieron de 3 pacientes con aislados sucesivos en un periodo de tiempo superior a un mes y 6 de otros 3 pacientes que presentaron cambios en la sensibilidad. El resto de las cepas guardaban similitudes inferiores al 85%. Los aislados mostraron porcentajes elevados de resistencia a ácido nalídixico (89,25%), ciprofloxacino (78,57%), cotrimoxazol (46,42%) y a aminoglicósidos: gentamicina (28,57%), tobramicina (28,57%) y amikacina (3,57%).
Conclusiones: El análisis de los perfiles de migración obtenidos tras digestión con XbaI mostró una gran variabilidad entre las cepas portadoras de este mecanismo de resistencia aislados de diferentes pacientes, lo que sugiere que no se ha establecido ningún clon con carácter endémico ni se han constatado propagaciones en forma de brotes o clusters.
Los niveles más altos de resistencia a antibióticos no betalactámicos se observaron en quinolonas y cotrimoxazol.
Palabras clave: DIVERSIDAD GENÉTICA; E. coli blaCMY-2;
