FACTORES GENÉTICOS ASOCIADOS A RESISTENCIA, PATOGENICIDAD Y EPIDEMIOLOGÍA DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS RESISTENTE A METICILINA Y A LINEZOLID

Autores:
NOELIA CALVO SÁNCHEZ*. HOSPITAL UNIVERSITARIO DE SALAMANCA. SALAMANCA. España
ROCÍO HIDALGO OROZCO. HOSPITAL UNIVERSITARIO INFANTA CRISTINA. BADAJOZ. España
SARAI RODRÍGUEZ GARRIDO. HOSPITAL UNIVERSITARIO INFANTA CRISTINA. BADAJOZ. España
CRISTINA GAONA ALVAREZ. HOSPITAL UNIVERSITARIO INFANTA CRISTINA. BADAJOZ. España
Mª INMACULADA GARCÍA GARCÍA. HOSPITAL UNIVERSITARIO DE SALAMANCA. SALAMANCA. España
JUAN LUIS MUÑOZ BELLIDO. HOSPITAL UNIVERSITARIO DE SALAMANCA. SALAMANCA. España

INTRODUCCIÓN. Staphylococcus aureus resistente a meticilina (MRSA) constituye un problema de primer orden en el campo de la patología infecciosa, dada su prevalencia y su nivel de multirresistencia. Las alternativas terapéuticas se reducen con frecuencia a un grupo pequeño de antimicrobianos. Además, la demostración de que CIMs de vancomicina por encima de 1 mg/L suponen un riesgo considerable de fracaso terapéutico, incrementa aún
más esta limitación. A ello se ha añadido la emergencia de resistencia a linezolid de codificación presumiblemente plasmídica, mediada por el gen cfr. Recientemente, Picazo et al. describieron el primer brote nosocomial de MRSA resistente a linezolid, mediado por cfr y asociado a transmisión nosocomial, en un contexto de uso frecuente de linezolid. En el presente estudio presentamos las características microbiológicas de una cepa de MRSA resistente a linezolid causante de un brote nosocomial en el Hospital Infanta Cristina de Badajoz.

MATERIAL Y MÉTODOS. Se estudiaron ocho aislamientos de MRSA resistente a linezolid obtenidos en el Hospital Infanta Cristina de Badajoz a finales de 2009. Los aislamientos procedían de infecciones de piel y tejidos blandos y
bacteriemias. La identificación y el antibiograma se llevaron a cabo por metodología convencional. La identificación se corroboró por EM MALDI-TOF. Se determinó la presencia de proteína PBP2a, y se confirmó la presencia del gen cfr mediante PCR. Finalmente, se determinó la presencia de 333 secuencias,  correspondientes a 171 genes de resistencia, patogenicidad y genes vinculados a la clasificación epidemiológica de S. aureus mediante PCR e hibridación con microarrays (S. aureus Typing Kit, Clondiag, Alemania),

RESULTADOS. Los 8 aislamientos mostraron un perfil idéntico en el microarray. Todos pertenecían al mismo complejo clonal, el CC5, también conocido como clon pediátrico (USA 800), y eran portadores del cassette SCC mecIV. Se detectó la presencia del gen cfr en todos los aislamientos. Además de cfr, la cepa era portadora de los genes de resistencia  fexA (resistencia a amfenicoles), tetE (resistencia a tetraciclinas) y aadD (resistencia a aminoglicósidos). La cepa era portadora también del cluster de genes codificadores de enterotoxinas egc, que incluye los genes seg, sei, sem, sen, seo, y seu/y, como es habitual en su grupo, y que codifican las enterotoxinas A, G, I, M, N, O y U. No se detectaron genes asociados a la producción de leucocidina de Panton Valentine (PVL), muy relacionada con la patogenicidad de las nuevas cepas de CA-SARM. Sí fueron, en cambio, positivos los genes codificadores de otras leucocidinas con dos componentes, como lukD-lukE y lukX-lukK, bastante más frecuente que la PVL en otros estudios, ya que están presentes en torno al 60% de las cepas. Tampoco se detectaron los genes de la toxina del síndrome de shock tóxico (TSST-1), aunque sí los de las hemolisinas: α,β,γ y δ.

DISCUSIÓN. La resistencia a  linezolid mediada por cfr parece estar en expansión en MRSA.   En este caso, se asocia a uno de los complejos clonales más frecuentes, y son portadores del cassette SCCmec más habitual en cepas extrahospitalarias. La cepa objeto de estudio presenta pocos genes determinantes de mecanismos de resistencia a otros antimicrobianos, como es por otra parte habitual en los portadores del SCCmec IV. Se trata de la primera descripción de la presencia de cfr en MRSA perteneciente al clon pediátrico.

Palabras clave: resistencia; Linezolid; MRSA;

 Staphylococcus aureus resistente a meticilina (SARM): un hallazgo infrecuente entre los estudiantes de Medicina del HCSC

Autores:
CARMEN RODRIGUEZ-AVIAL *. FACULTAD DE MEDICINA. UCM. MADRID. España
ICIAR RODRIGUEZ-AVIAL. SERVICIO DE MICROBIOLOGIA. HCSC. MADRID. España
JULIA ARCONES. HOSPITAL CLINICO SAN CARLOS. MADRID. España
JUAN J. PICAZO. HOSPITAL CLINICO SAN CARLOS. MADRID. España

Introducción: SAMR es un patógeno de gran trascendencia. La vigilancia y el control de SARM debe ser una prioridad para todos los centros hospitalarios. Las recomendaciones para el control de este microorganismo en el hospital incluyen la detección activa de la colonización en pacientes y personal sanitario. En este marco nuestro objetivo fue determinar la prevalencia de portadores nasales de SARM entre los estudiantes de Medicina el año de su entrada en el hospital. Además quisimos establecer la sensibilidad de los S.aureus aislados a otros antimicrobianos. Se estudiaron trece grupos de estudiantes a lo largo de 2008, 2009, 2010 y 2011. Un objetivo añadido fue realizar su formación en aspectos relativos a los SAMR mediante la resolución de problemas guiados por preguntas. Métodos: A todos los estudiantes  de cada grupo se les realizaron exudados nasales, siguiendo las recomendaciones GEIH-SEIMC, que fueron inoculados en placas de agar sangre, agar ChrmID SAID y agar ChrmID MRSA (que incluye meticilina). Las colonias de color verde crecidas en agar ChrmID SAID y agar ChrmID MRSA fueron identificadas por los métodos habituales. El estudio de sensibilidad a los antibióticos se realizó por el método de difusión con discos en agar Muller-Hinton (CLSI). El test de inducción de beta-lactamasa se realizó a los aislados con halo de inhibición de penicilina de diametro ≥29mm. Resultados: De un total de 349 estudiantes 101 (29,23%) fueron portadores de SA. Un solo caso de portador de SARM fue detectado en total (0,28%), pertenecía a un grupo del curso 2011. El ochenta y dos por ciento de las cepas fue resistente a  penicilina,  el 28% a eritromicina y a clindamicina, el 4% lo fue a tetraciclina. Todos los aislados fueron sensibles a vancomicina, teicoplanina, gentamicina, tobramicina, ciprofloxacino, cotrimoxazol, cloranfenicol y rifampicina.

Conclusiones: La prevalencia de portadores nasales de SA en el conjunto de alumnos pre-clinicos es similar a la encontrada en la mayoría de los estudios, tanto de estudiantes de medicina como de la población sana(25%-35%). Las diferencias entre los distintos grupos no fueron significativas, tampoco entre los 4 años de estudio. La prevalencia de portadores de SARM, un caso en 2011,  fue inferior a la publicada en otros estudios. La resistencia a penicilina fue inferior a la esperada(> 90%).  El porcentaje de aislados sensibles a todos los  antibióticos estudiados(excluyendo penicilina) fue del 70%. Dado que tras el contacto profesional con pacientes y personal sanitario en el hospital se espera un incremento en los portadores de SAMR, los estudiantes de medicina deberían tener un cuidado especial en las medidas de higiene como un frecuente y adecuado lavado de manos y precauciones de contacto cuando sea necesario durante su trabajo en el hospital.

Palabras clave: SARM; PORTADORES NASALES;

Susceptibilidad a los antibióticos de 256 cepas de Staphylococcus aureus resistentes a meticilina (SARM) ST398

Autores:
Ana I. Morcillo. Medicina Preventiva y Salud Pública. Universidad de La Laguna. La Laguna. España
Juan Carlos González*. Servicio Canario de la Salud. Gobierno de Canarias. Santa Cruz de Tenerife. España
Beatriz Castro. Servicio de Microbiología y Medicina Preventiva del Hospital Universitario de Canarias. La Laguna. España
Cristobalina Rodríguez-Álvarez. Medicina Preventiva y Salud Pública. Universidad de La Laguna. La Laguna. España
Rossana Abreu. Medicina Preventiva y Salud Pública. Universidad de La Laguna. La Laguna. España
Angeles Arias. Medicina Preventiva y Salud Pública. Universidad de La Laguna. La Laguna. España

Antecedentes y objetivos: El secuenciotipo ST398 de SARM ha sido identificado en animales, especialmente en cerdos y su transmisión a los seres humanos ha sido demostrada. Este secuenciotipo presenta una alta capacidad para adquirir elementos móviles, lo que puede llevar a la rápida adquisición de factores que contribuyan a su virulencia así como a la multirresistencia. El objetivo del estudio fue determinar el perfil de resistencia frente a 18 antibióticos de 256 cepas de SARM ST398 aisladas de 300 muestras nasales de cerdos de la cabaña porcina de Tenerife procedentes de 27 explotaciones y relacionarla con el tipo de Cassette Cromosómico Estafilocócico (SCCmec) que presentaban.

Metodología: Una vez identificadas las colonias de SARM mediante placas cromogénicas MRSA (BioMérieux®) y confirmación con la prueba de la estafilasa (Slidex® Staph Plus) y la Proteína Ligadora de la Penicilina PBP2’ (MRSA- Screen®), se realizó la tipificación molecular mediante Electroforesis en Campo Pulsado (PFGE) y posterior secuenciación génica. Para el estudio de resistencia antimicrobiana se utilizó el sistema automatizado VITEK 2 y las tarjetas AST-P588 (Biomerieux, Marcy l’Etoile, France®). Se utilizó como control la cepa de referencia S. aureusATCC 29213.

Resultados: Los aislados SARM ST398 tipo SCCmec IV  representaron el 39% mientras que los tipo SCCmec V fueron el 61%(p<0,001). La resistencia a los antibioticos en los tipos SCCmec IV y V, respectivamente, fue: Gentamicina (98%,3%), Tobramicina (98%,5%), Levofloxacino (0%,21%), Eritromicina (37%,31%) y Cotrimoxazol (88%,9%). El patrón de multirresistencia más común fue el que incluía junto a los beta-lactámicos a eritromicina y clindamicina. La multirresistencia (tanto en frecuencia como en número de antibióticos) fue significativamente más prevalente entre los aislados SARM ST398 con SCCmec IV (p<0,001).

Conclusión: La elevada multirresistencia encontrada SARM ST398, y la elevada prevalencia de este secuenciotipo entre los SARM aislados de muestras porcinas, hace imprescindible implementar medidas de control de la utilización de antibióticos en veterinaria, con la finalidad de evitar la selección y difusión de clones/secuenciotipos multirresistentes.

Palabras clave: SARM ST398; resistencia antibiótica;

AISLAMIENTO DE HAEMOPHILUS SP. EN MUESTRAS RESPIRATORIAS DE PACIENTES CON SOSPECHA DE TUBERCULOSIS PULMONAR

Autores:
Irene Pena*. Hospital Clinico San Carlos. Madrid. España
Ana Arribi. Hospital clinico San Carlos. Madrid. España
Angela Racionero. Hospital Clinico San Carlos. Madrid. España
Raquel Salvador. Hospital Clinico San Carlos. Madrid. España
Juan Jose Picazo. Hospital Clinico San Carlos. Madrid. España

OBJETIVO: Describir las características microbiológicas de las muestras respiratorias de pacientes con sospecha de tuberculosis pulmonar.

MATERIAL Y METODOS: Se han estudiado de manera retrospectiva las muestras de tracto respiratorio inferior recibidas en el laboratorio de Microbiología durante un período de 6 meses (Enero a Junio de 2011). Se han tenido en cuenta tanto los esputos (ESP) como los broncoaspirados (BAS), lavados broncoalveolares (BAL) y catéteres telescopados (CTP) de pacientes con sospecha clínico-radiológica de tuberculosis. Se han estudiado los aislamientos bacterianos y las micobacterias aisladas en cada cultivo. La identificación bactariana se realizó mediante métodos automatizados, Wider^® (Soria -Melguizo) y las colonias compatibles con Haemophilus sp. se estudiaron mediante espectrometría de masas, MALDI-TOFF^® (Bruker).

RESULTADOS: Durante el período estudiado se recibieron 2778 muestras recogidas de tracto respiratorio inferior, de las cuales 322 correspondían a pacientes con sospecha de infección respiratoria en los que se requería descartar tuberculosis, para lo cual fueron procesadas para cultivo bacteriológico y para micobacterias. La edad media de los pacientes fue de 63 años (2-97), 100 mujeres y 103 varones. Del total de muestras se obtuvo crecimiento de Mycobacterium tuberculosis en 1 (0.31%), se obtuvo crecimiento de Haemophilus sp. en 211 muestras (65.5%), en 111 se obtuvo además crecimiento de otras bacterias (34.5%). En la siguiente tabla se detalla las especies de Haemophilus sp. desglosados por especie y número de muestras.

CONCLUSIONES:

Haemophilus sp. se aísla en un número importante de pacientes cuya principal sospecha clínico- radiológica es la Tuberculosis y en los que, salvo en un caso en nuestro estudio, no se aísla  M. tuberculosis. La infección pulmonar por Haemophilus sp. debe tenerse en cuenta en pacientes en los que se sospecha Tuberculosis.

Palabras clave: tuberculosis; infeccion respiratoria; haemophilus;

ABORDAJE TERAPÉUTICO DE LA INFECCIÓN ODONTOGÉNICA EN EL PACIENTE ALÉRGICO A LOS BETA-LACTÁMICOS. 2009-2011. HOSPITAL UNIVERSITARIO DE LA PRINCESA. MADRID.

Autores:
Mª del Carmen Martínez Jiménez*. Hospital Universitario de la Princesa. Madrid. España
Laura Llorca Ortiz. Hospital Universitario de la Princesa. Madrid. España
Alba Guiu Martínez. Hospital Universitario de la Princesa. Madrid. España
Diego Domingo. Hospital Universitario de la Princesa. Madrid. España
Manuel López-Brea. Hospital Universitario de la Princesa. Madrid. España

Introducción: La infección odontogénica tiene su origen en la formación, evolución, maduración y desarrollo de la biopelícula dental, que sumado a la expresión de factores de virulencia bacterianos, así como a los cambios inmunológicos del huésped pueden dar lugar a exacerbaciones clínicas y/o a  la extensión a otros lugares del organismo. Los patógenos más prevalentes en estas infecciones son los Streptococcus grupo viridans y los anaerobios. Para la elección de los antibióticos más adecuados debemos tener en cuenta las resistencias naturales así como las adquiridas. Actualmente se emplean como antibióticos empíricos de primera elección la Amoxicilina/Clavulánico y la Clindamicina en los pacientes alérgicos a los betalactámicos. Sin embargo, se han objetivados la aparición de resistencias, principalmente a betalactámicos, clindamicina y macrólidos como respuesta al uso inadecuado de los antibióticos.

Objetivos: Estudio de las resistencias en el Streptococcus del grupo víridans aislados de muestras procedentes de exacerbaciones de infecciones odontogénicas y extrapolación al paciente alérgico a los betalactámicos.

Métodos: Las muestras de infecciones odontogénicas recibidas durante el periodo 2009-2011 fueron sembradas en medios generales de Agar Sangre, Chocolate y medios para anaerobios de Sangre, Chocolate, SCS, Kanavanco y Feniletanol, así como en medios de enriquecimiento tipo BACTEC. Incubación hasta las 48 horas en las atmósferas de O2, CO2, o en anaerobiosis. La identificación de los Streptococcus del grupo víridans se efectuó por API rapidID32 Strep. El antibiogra, por el método de difusión en disco en Muller-Hinton Sangre incubando en CO2. Protocolo e interpretación según CLSI M100.

Resultados:   

Las resitencias para la Amoxi/Clav y para la Clindamicina fueron respectivamente del 13.15% y del 60.52%.

Conclusiones: Betalactámicos, Macrólidos y Clindamicina son los que presentan mayor porcentaje de resistencia. Amoxi/clavulánico puede seguir empleándose como tratamiento empírico de elección en la infección odontogénica. Clindamicina y Macrólidos no deben emplearse en nuestra área como tratamiento de elección en alégicos a batelactámicos, debiendo emplear otras alternativas, como las quinolonas. Es necesario vigilar las resistencias de nuestra área sanitaria.

Palabras clave: infección odontogénica. S. gr viridans. Resistencias;